考马斯亮蓝G250

中文名称：考马斯亮蓝G250。二甲花青亮蓝
英文名称：Coomassie Brilliant blue G-250 (C.I. 42655)，rilliant blue G 
分子量：854.04 g/mol 
分子式：C47H48N3NaO7S2 
CAS NO.：6104-58-1 
λmax. (buffer pH 7.0)：577 - 584 nm 
E 1 %/1 cm, λmax. (pH 7.0)：450 - 570 
用途：亮蓝G250，是一种甲基取代的三苯基甲烷，染色灵敏度不如R250，但比氨基黑高3倍，马斯亮蓝G-250在游离状态下呈红色，最大光吸收在465nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比。 考马斯亮蓝G250是布拉德福德(Bradford)蛋白质定量试剂的主要成分。它在三氯乙酸中不溶而成胶体，能选择地染色蛋白而几乎无本底色。所以常用于需要重复性好和稳定的染色，适于作定量分析。G250常用的蛋白染料，作定性试验用,染色后为蓝绿色

考马斯亮蓝法测定蛋白质含量
　　该方法用于大多数蛋白质的定量是比较精确的，但不适用于小分子碱性多肽的定量。如核糖核酸酶或溶菌酶。去污剂的浓度超过0．2%影响测定结果。如TritonX-100、SDS、NP-40等。常用于细胞骨架的检验。 
1．Bradford浓染液的配制：
　　将100mg考马斯亮蓝G-250溶于50m1 95%乙醇，加入100ml浓磷酸，然后，用蒸馏水补充至200ml，此染液放4℃至少6个月保持稳定。 
2．标准曲线蛋白质样本的准备：
　　尽量使用与待测样本性质相近的蛋白质作为标准品，例如测定抗体，可用纯化的抗体作为标准。如果待测样本是未知的，也可用抗体作为标准蛋白。通常在20ug—150ug/100ul之间绘制标准曲线。 
3．溶解：
　　将待测样本溶于100~1缓冲溶液中，该缓冲溶液应与制作标准曲线的缓冲溶液相同(最好用PBS)。 
4．稀释：
　　按1：5用蒸馏水稀释浓染料结合溶液，如出现沉淀，过滤除去。 
5．作用：
　　每个样本加5ml稀释的染料结合溶液，作用5～30min。染液与蛋白质结合后，将由红色变为蓝色，在595nm波长下测定其吸光度。注意，显色反应不得超过30min． 
6．计算：
　　根据标准曲线计算待测样本的浓度。 

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产品详情
AppliChem  A3480 Coomassie Brilliant blue G-250 (C.I. 42655) 10g,25g,100g

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