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核酸实验室污染原因和处理办法,气溶胶污染考虑到没?

   日期:2021-04-08     来源:微生物大讲堂    浏览:780    
核心提示:核酸检测技术有诸多优点,但由于其超高的灵敏度,一旦实验室出现核酸污染,很容易导致假阳性结果,从而影响检测的准确性。样本处
 核酸检测技术有诸多优点,但由于其超高的灵敏度,一旦实验室出现核酸污染,很容易导致假阳性结果,从而影响检测的准确性。

样本处理环节抽提核酸和检测环节扩增产物泄露均会导致核酸污染,飞溅的扩增产物会形成气溶胶漂浮在空气中,粘附到物体表面及检测人员身体 上,随着人员及物料流动而污染整个实验室。

实验室一旦发生核酸污染极难清除,会造成实验室短期内无法开展工作,因此防范和清除核酸污染是分子检测实验室的工作重点。

目前的核酸检测均采用闭管检测以防止开盖形成气溶胶,同时采取严格的物理隔绝法,检测依次分为试剂准备区-样本准备区-扩增区-产物检测区,且逐级压,这些策略都最大程度地防止了气溶胶污染,但核酸污染事故依然时有发生。由于核酸检测步骤较多,且多个环节样本直接暴露于空气中,任何一个环节出现一点小纰漏就容易导致整个实验室的污染。即使严格按照规程操作,核酸污染依然无法彻底避免。

核酸污染主要体现在样本核酸或扩增产物在台面、设备、检测人员表面的核酸残留,以及扩增产物形成的气溶胶。气溶胶由于颗粒较小,若不做处理可长期漂浮在空气中持续影响实验室的检测。

核酸实验室污染的主要原因有:标本污染; 试剂污染; 产物污染; 设备污染; 其他污染。

其解决措施 为:标本污染:重新采样进行检测,评估标本前处理环节;

试剂污染:更换新的试剂重新检测评估;

设备污染:设备整体消毒清洁、维护;

产物污染:全面清洁消毒实验室、仪器设备所有实验有关用品。

发现污染,检测工作应立即停止,直到确认消除污染后才能重新开始检测。首先,要查找污染源和明确污染范围。然后,根据污染源和污染范围采取有效的去污染措施,结合各种不同方法以达到最佳效果。

实验室污染的处理:

1.标本污染生物安全柜的操作台造成局限污染时:

立即用吸水纸覆盖,并使用0.55%含氯消毒剂进行喷洒消毒。消毒液需要现用现配,24小时内使用。

2.标本倾覆造成实验室污染时:

保持实验室空间密闭,避免污染物扩散。立即使用润湿有0.55%含氯消毒剂的毛巾覆盖污染区。必要时(如大量溢撒时)可用过氧化氢加热熏蒸实验室,剂量为2g/m ,熏蒸过夜;或20g/L过氧乙酸消毒液用气溶胶喷雾器喷雾,用量8ml/m ,作用1-2小时;

3.清理污染物时:

严格遵循活病毒生物安全操作要求,采用压力蒸汽灭菌处理,并进行实验室换气等,防止次生危害。

 
 
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