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微生物学技术:紫外线灭菌实验

   2024-05-04 上海北诺生物科技有限公司463

     紫外线灭菌是用紫外线灯进行的,波长为200~300 nm 的紫外线都有杀菌能力,其中以260 nm 的杀菌力最强。在波长一定的条件下,紫外线的杀菌效率与强度和时间的乘积成正比。紫外线杀菌机制主要是因为它诱导了胸腺嘧啶二聚体的形成,从而抑制了DNA的复制。

 
实验方法
  • 紫外线灭菌
实验方法原理 由于辐射能使空气中的氧电离成[O],再使O2氧化生成臭氧(O3)或使水(H2O)氧化生成过氧化氢(H2O2),O3和H2O2均有杀菌作用。紫外线穿透力不大,所以,只适用于无菌室、接种箱、手术室内的空气及物体表面的灭菌。紫外线灯距照射物以不超过1.2 m 为宜。
试剂、试剂盒
仪器、耗材
实验步骤
1.  单用紫外线照射

(1)在无菌室内或在接种箱内打开紫外线灯开关,照射30分钟,将开关关闭。

(2)将牛肉膏蛋白胨平皿盖打开15分钟,然后盖上皿盖,置37℃培养24小时。共做三套。

(3)检查每个平皿上生长的菌落数。如果不超过4个,说明灭菌效果良好,否则,需延长照射时间或同时加强其他措施。

2.  化学消毒剂与紫外线照射结合使用

(1)在无菌室内,先喷洒3~5%的石炭酸溶液,再用紫外线灯照射15分钟。

(2)无菌室内的桌面、凳子用2~3%来苏尔擦洗,再打开紫外线灯照射15分钟。

(3)检查灭菌效果。

由于紫外线对眼结膜及视神经有损伤作用,对皮肤有刺激作用,所以,不能直视紫外线灯光,更不能在紫外线灯光下工作。
 
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